【摘 要】
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目的 采用凝聚态 Aβ2 5- 35建立 Tau蛋白过度磷酸化的阿尔茨海默病样细胞模型。 方法 用不同浓度凝聚态 Aβ2 5- 35作用于 SH - SY5 Y细胞 2 4 ,4 8,72 h,通过四唑盐比色
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院; 福建省老年医学研究所; 福建省老年医学研究所 福州350001; 福州350001; 福州350001;
【基金项目】
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国家自然科学基金课题 ( 3 0 2 71611)
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目的 采用凝聚态 Aβ2 5- 35建立 Tau蛋白过度磷酸化的阿尔茨海默病样细胞模型。 方法 用不同浓度凝聚态 Aβ2 5- 35作用于 SH - SY5 Y细胞 2 4 ,4 8,72 h,通过四唑盐比色法及乳酸脱氢酶释放实验观察 Aβ2 5- 35对 SH-SY5 Y细胞存活的影响 ;选择对细胞存活影响较小的适宜浓度和作用时间处理细胞 ,以蛋白免疫印迹法研究 Tau蛋白磷酸化水平的变化。 结果 Aβ2 5- 35对细胞存活的影响随着作用时间的延长或作用浓度的增加而增强。 1 0μm ol/ L Aβ2 5- 35作用于细胞 72 h或 2 0μm ol/ L Aβ2 5- 35作用于细胞≥ 4 8h时 ,MTT代谢率均明显下降 (P<0 .0 5 )。Aβ2 5- 35作用浓度 >2 0μmol/ L作用 72 h后 ,细胞 L DH释放率明显增加 (P<0 .0 5 )。选用细胞毒性小的 1 0 ,2 0μmol/L Aβ2 5- 35作用于 SH- SY5 Y细胞 0 ,3,6 ,1 2 ,2 4 ,4 8h,蛋白免疫印迹示 Tau蛋白在 Ser396、Ser1 99/ 2 0 2位点的磷酸化水平增高 ,于 6 h达到最高峰。 结论 凝聚态 Aβ2 5- 35可诱导建立阿尔茨海默病样 Tau蛋白过度磷酸化的细胞模型
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