核桃V-ATPase c亚基基因(JrVHAc4)的克隆和抗旱功能分析

来源 :南京林业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:woyaopojiemimaya
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[目的]V-ATPase是植物逆境响应的重要酶,有必要了解V-ATPase相关亚基参与核桃响应逆境胁迫的功能机制.[方法]从‘香玲’核桃转录组中克隆获得1条V-ATPase c亚基基因(命名为JrVHAc4),通过分析启动子预测其逆境响应功能.对JrVHAc4基因进行干旱胁迫下的表达分析,同时构建JrVHAc4酵母表达载体转入酵母表达系统研究其抗旱功能.[结果]JrVHAc4基因开放读码框(ORF)全长495 bp,拟推导的蛋白分子量为16 527.61 u,包含164个氨基酸,理论等电点为8.62;其上游1 047 bp启动子包含MYC、DOF、MYB等与干旱响应相关的顺式作用元件.干旱胁迫下,JrVHAc4基因在核桃叶和根中均被显著诱导,并存在差异.对JrVHAc4转基因酵母进行不同浓度甘露醇胁迫,与对照酵母相比,发现JrVHAc4基因的表达能显著提高转基因酵母的生长活性.[结论]JrVHAc4基因能响应干旱胁迫,并能提高酵母的抗旱能力,JrVHAc4可作为核桃抗逆重要候选基因.
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