【摘 要】
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目的制备抗弓形虫特异性单克隆抗体并初步应用.方法弓形虫RH株体外细胞培养增殖、纯化后灭活并超声波破碎免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合.酶免法筛查阳
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科
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目的制备抗弓形虫特异性单克隆抗体并初步应用.方法弓形虫RH株体外细胞培养增殖、纯化后灭活并超声波破碎免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1进行融合.酶免法筛查阳性杂交瘤并局限性稀释法进行克隆.免疫荧光、组化及印迹对筛选后的克隆进行鉴定,最终获得的杂交瘤制备腹水并使用ProteinG进行纯化.结果2只小杂交瘤融合后初步筛查出约80株阳性克隆.剔除与其它抗原有交叉反应、抗体效价低的克隆,最终获得抗弓形虫单抗杂交瘤1株,即14H4-1.免疫荧光和免疫组化显示该株单抗与弓形虫RH具有良好的反应性,免
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