【摘 要】
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目的利用克隆和表达sahH基因,恢复大肠杆菌密度感应缺陷株的甲基循环通路。方法通过扩增铜绿假单胞菌sahH基因,克隆到pGEX4T-1载体上,继而转入大肠杆菌密度感应缺陷株。诱导
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院牙体牙髓病科
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目的利用克隆和表达sahH基因,恢复大肠杆菌密度感应缺陷株的甲基循环通路。方法通过扩增铜绿假单胞菌sahH基因,克隆到pGEX4T-1载体上,继而转入大肠杆菌密度感应缺陷株。诱导培养后,经考马斯亮蓝染色及蛋白印迹鉴定SahH-GST融合蛋白的表达。结果成功扩增并克隆了sahH基因,在大肠杆菌密度感应缺陷株中表达出约75 ku大小的蛋白,其大小与SahH-GST蛋白相符。结论大肠杆菌密度感应缺陷株内可以表达外源基因sahH,恢复了甲基循环的该菌株可进一步应用于密度感应与代谢循环调节作用的实验。
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