【摘 要】
：
目的比较3种纯化方法对表达的肠道病毒71型(EV71)VP1区包涵体蛋白的纯化效果。方法分别用差速离心法、固定化金属离子亲和层析(IMAC)及不同浓度饱和硫酸氨沉淀法3种包涵体蛋
【机 构】
：
解放军第三0二医院临床研究管理中心
论文部分内容阅读
目的比较3种纯化方法对表达的肠道病毒71型(EV71)VP1区包涵体蛋白的纯化效果。方法分别用差速离心法、固定化金属离子亲和层析(IMAC)及不同浓度饱和硫酸氨沉淀法3种包涵体蛋白纯化法对原核表达EV71 VP1包涵体蛋白进行纯化,蛋白垂直(SDS-PAGE)电泳检测蛋白纯化效果。结果差速离心法可以进行大批量表达蛋白纯化,纯化效果较好,但存在蛋白损失较多,且纯化蛋白不能反复冻融的问题。IMAC柱纯化获得的蛋白纯度较高,且蛋白性状稳定,但仍存在纯化蛋白量较少的问题。饱和硫酸氨沉淀纯化法无法获得纯度较高的包涵体蛋白。结论差速离心法可用于大批量蛋白纯化,纯化蛋白应避免反复冻融,可小量分装冻存后备用。IMAC柱纯化可获得纯度较高且性状相对稳定的纯化蛋白,其在相应抗体检测方法学的建立及疫苗制备方面均有广泛用途。饱和硫酸氨法只适用于表达蛋白的初步浓缩纯化。
其他文献
【正】齿轮淬火变形是热处理工序的必然结果,如何将产品淬火变形减少到最低,是一个大难题。一般采用节能高效的新型热处理设备、有针对性地选择适宜的淬火温度、淬火冷却介质
<正>新生儿监护病房收治对象为毫无表达能力的新生儿,由于患儿免疫能力较差,不可与外来人员接触过频,导致家属每天探访时间较短,无法给患儿提供充足的关爱和照护[1]。而护士
虚实结合是中国古典美学和文艺中极具理论价值和民族特色的艺术表现手法,其巧妙运用可以创造出含蓄蕴藉的朦胧美、回味无穷的想象美、以少总多的简洁凝练美、颠倒时空的曲折
目的观察参麦注射液联合肠内营养对腹部手术患者的肠黏膜屏障功能及免疫功能的影响。方法所有患者均给予全胃肠内营养持续。治疗组在对照组的基础上每天参麦注射液(正大青春
共同过失犯罪是否成立,尚存争议。然而,如果结合主客观相一致的原则,那么共同过失正犯、过失教唆犯等共同过失行为有其成立的依据,符合共同犯罪的主客观构成要件;对共同过失
目的对新媒体视阈下昆明市社区居民中医健康素养等级进行评价。方法基于文献调查和专家评价法建立居民新媒体中医健康素养评价体系,应用Fuzzy-AHP法确定指标权重,通过一致性
目的:分析我院抗高血压药物应用情况和使用特点,为进一步合理用药提供参考。方法:回顾性分析抗高血压药物应用情况。结果:2010～2012年各类抗高血压药物销售金额逐年增加,其中,
本文首先讨论了智能住宅的国内外发展概况,并根据国外发展的趋势和我国的国情,针对学生公寓面临的问题,研究并设计了一种基于单片机的学生公寓安全防范测控系统。此系统以PIC
阐述了水润滑轴承承载特点。结合某特定工况下主泵电机中水润滑推力轴承的设计,通过对轴承在材料、结构、工艺等方面进行了研究与改进,提出了提高水润滑推力轴承承载力的方法
糖尿病、高血压、心肌梗死等心脑血管疾病的发病率逐年增高,发病年龄趋于年轻化;因此需要进行手术及麻醉的患者中患有心脑血管疾病的比例也逐年增高。许多心脑血管疾病的发生