【摘 要】
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目的 探讨RNA干扰Tax基因表达对人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)患者细胞凋亡的影响.方法 运用RNAi技术特异性干扰Tax基因的表达,流式细胞技术和
【机 构】
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汕头大学医学院第一附属医院神经内科,广东省汕头,515041;汕头大学医学院第一附属医院检验科,广东省汕头,515041
【基金项目】
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广东省汕头市重点科技计划项目;广东省科技计划项目
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目的 探讨RNA干扰Tax基因表达对人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)患者细胞凋亡的影响.方法 运用RNAi技术特异性干扰Tax基因的表达,流式细胞技术和western blot法鉴定Tax蛋白的表达情况,并运用流式细胞技术对干扰后的T淋巴细胞(TLC)凋亡情况及凋亡相关因子Fas、Bcl-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)进行检测.结果 重组质粒psiTax/U6转染T细胞(9.84±3.32)％后,Tax蛋白的表达较未处理组(47.45±14.52)％和pSilencer1.0/U6转染组(45.98±10.66)％明显降低(t=9.51,14.93,均P＜0.01)；western blot法显示重组质粒psiTax/U6转染TLC后,Tax表达较pSilencerl.0/U6转染组明显降低；RNAi干扰组的凋亡率(21.55±1.37)％较未处理组(47.80±3.36)％显著降低(t=24.17,P＜0.01)；RNAi干扰组Fas,TNF-α显著降低(t=17.83,16.85,均P＜0.01),而Bcl-2显著升高(t=5.21,P＜0.01).结论 运用RNA技术干扰Tax基因抑制Tax基因表达,可以有效抑制TLC细胞的凋亡.凋亡相关因子Fas,TNF-αand Bcl-2在此过程中发挥重要作用.
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