【摘 要】
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目的 探讨盘龙七片对关节炎软骨细胞增殖、凋亡、基质降解和炎症反应的影响及其机制.方法 采用膝关节穿刺注射木瓜蛋白酶法制备膝骨关节炎大鼠模型,并分离培养骨关节炎软骨细胞.骨关节炎软骨细胞分为:对照组(正常培养),30,60,90,120μg/ml组(盘龙七片处理24 h),盘龙七片+PCAT-1组(转染pcDNA3.1-PCAT-1后60μg/ml盘龙七片处理24 h),盘龙七片+pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1后60μg/ml盘龙七片处理24 h).CCK-8法测定各组细胞增殖.Hoechst 3
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院骨一科,西安 710004
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目的 探讨盘龙七片对关节炎软骨细胞增殖、凋亡、基质降解和炎症反应的影响及其机制.方法 采用膝关节穿刺注射木瓜蛋白酶法制备膝骨关节炎大鼠模型,并分离培养骨关节炎软骨细胞.骨关节炎软骨细胞分为:对照组(正常培养),30,60,90,120μg/ml组(盘龙七片处理24 h),盘龙七片+PCAT-1组(转染pcDNA3.1-PCAT-1后60μg/ml盘龙七片处理24 h),盘龙七片+pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1后60μg/ml盘龙七片处理24 h).CCK-8法测定各组细胞增殖.Hoechst 33258测定各组细胞DNA含量.TUNEL法测定各组细胞凋亡.Western blot检测细胞中ACAN、COL2A1、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量.ELISA检测各组上清液炎症因子IL-1β和TNF-α表达水平.RT-qPCR检测lncRNA前列腺癌相关转录本1(prostate cancer-asso-ciated transcript1,PCAT-1)表达量.结果 与对照组比较,30μg/ml组中细胞增殖、凋亡、DNA含量、炎症因子(IL-1β和TNF-α)水平、ACAN、COL2A1、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量均没有明显的变化;60,90,120μg/ml组骨关节炎软骨细胞增殖、DNA含量、ACAN和COL2A1蛋白表达显著上升(P<0.05),骨关节炎软骨细胞凋亡、IL-1β和TNF-α水平、MMP-13和Caspase-3蛋白表达显著下降(P<0.05);60μg/ml组中PCAT-1表达量显著降低(P<0.05).与盘龙七片+pcDNA3.1组比较,盘龙七片+PCAT-1组中细胞增殖和ACAN表达量显著下降,IL-1β和TNF-α水平、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量显著升高(P<0.05).结论 盘龙七片可能通过PCAT-1促进骨关节炎软骨细胞增殖及抑制细胞凋亡、炎症反应和细胞基质降解,为解析盘龙七片治疗骨关节炎的药理机制提供依据.
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