【摘 要】
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目的 研究AK078438基因的克隆表达、组织分布和在不同肿瘤细胞中的表达及该蛋白的亚细胞定位.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法扩增AK078438基因的全长开放阅读框(open reading frame,ORF),原核表达系统表达,亲和层析纯化该基因的融合蛋白,半定量RT-PCR方
【机 构】
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610064,成都,四川大学生命科学学院，成都生物制品研究所,生物治疗国家重点实验室,生物治疗国家重点实验室,610064,成都,四川大学生命科学学院,610064,成都,四川大学生命科学学院
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目的 研究AK078438基因的克隆表达、组织分布和在不同肿瘤细胞中的表达及该蛋白的亚细胞定位.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法扩增AK078438基因的全长开放阅读框(open reading frame,ORF),原核表达系统表达,亲和层析纯化该基因的融合蛋白,半定量RT-PCR方法在mRNA水平检测该基因在正常小鼠组织、肿瘤细胞以及间充质干细胞的分布.构建该绿色荧光融合蛋白的真核载体转染细胞,观察该蛋白在细胞中的定位.结果 AK078438基因全长ORF为1065 bp,编码355个氨基酸.mRNA水平上,该基因表达于小鼠的大脑、子宫、结肠、肾脏、睾丸和骨髓,在心脏、脾脏、肺、肝脏、胃中不表达.在小鼠结肠癌细胞株C26、黑色素瘤细胞株B16、小鼠Lewis肺癌LL/2,间充质干细胞中均有表达,在小鼠肝癌细胞系Hepa,小鼠骨髓细胞瘤NS-1中不表达.该蛋白定位于细胞质中.结论 对AK078438的蛋白表达、亚细胞定位、表达谱等分析为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
其他文献
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2006年10月22-25日，来自世界的人类基因组学领域的领军人物将汇聚杭州，参加“2006国际基因组学大会（中国杭州）”，共同探讨基因组学的最新进展和研究热点，同时还将专题讨论基于全基因组测序的个体化医学。
患儿女,8岁,以"巩膜黄染3月余" ,在当地医院就诊并入院治疗.患儿在3个月前不明原因出现巩膜黄染,入院两周后肝功示:总胆红素93.2 μmol/L(正常值:5.1～28.0 μmol/L),给予保肝治疗15天,效果不佳,黄疸加重,来本院就诊,以"溶血性黄疸"收入院。
目的 对中国汉族人载脂蛋白B基因EcoRⅠ和XbaⅠ酶切位点限制性片段长度多态性与冠心病相关性的研究进行Meta分析。方法通过文献检索收集中国汉族人载脂蛋白B基因EcoRⅠ和XbaⅠ酶切位点限制性片段长度多态性与冠心病关系的病例-对照研究，剔除不符合要求的文献，对入选文献进行一致性检验并根据检验结果进行数据合并，计算总比值比（odds ratio，OR）。结果共6篇关于EcoRⅠ和7篇关于XbaⅠ
目的 探讨caspase 9(CASP9)基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点在非小细胞肺癌患者和正常人中的分布情况.方法 应用逆转录-PCR方法检测了81例NSCLC患者及对应癌旁正常组织中CASP9的表达情况;应用限制性片段长度多态性技术结合测序
目的 了解骨代谢相关基因多态性与盐酸雷洛昔芬( raloxifene,RLX)对绝经后骨质疏松妇女骨密度(bone mineral density, BMD)和骨转换指标影响的关系.方法为随机、对照和双盲试验,入选47～74岁68例无亲缘关系的绝经后骨质疏松汉族妇女,随机分为RLX组和安慰剂组(各34例),RLX组日服RLX 60 mg,安慰剂组服与RLX外观一致的安慰剂,共1年.在服药前、服药后
先证者(图1,Ⅲ4) 女,44岁.39岁时渐出现双下肢乏力,上楼梯略困难,双脚麻木,双下肢渐变细.43岁时平地行走尤其穿拖鞋行走困难、易摔倒,双上肢持物力弱.查体:智力正常,跨阈步态,双手大小鱼际肌轻度萎缩,大腿中下1/3交界处以下的双下肢明显萎缩变细,呈"鹤腿"状(图2)。
先证者(Ⅲ1) 男,25岁.因颈部不自主向左侧扭转伴阵发性的肢体抖动7年到我院就诊.患者于18岁开始出现短暂发作的双上肢肌阵挛,半年后出现了阵阵颈部不自主向左侧扭转。
先证者(Ⅲ9) 女,50岁.25年前双手掌及双跖部开始出现点状淡黄色角化性丘疹,一般直径0.2～0.3 cm,质地坚硬,将丘疹剥离后可见皮损中心呈现火山口样凹陷,双跖部皮损有触痛,随着年龄的增长皮损逐渐增多,数目多而分散,曾在外院用多种药物治疗,疗效不佳,遂来我科就诊。
先证者 男,37岁,汉族,已婚.2006年11月因"头面及胸背部反复红斑伴发热及关节痛2年"入院.入院时查体:头皮、面部、双耳、肩背部及胸前皮肤可见片状红斑、渗出液少,其上有结痂,境界欠清,对称分布,无明显水疱;颈部及腹股沟处可扪及肿大淋巴结,黄豆大小、活动可、有压痛;口腔黏膜无糜烂,双下肢有散在红斑、丘疹。