pTRE-2hyg—HBX质粒的构建和初步表达鉴定

来源 :中国中西医结合外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:d102169104
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目的:构建含HBV(hepatitis B virus)X基因的真核表达载体pTRE-2hyg—HBX,从而建立Tet-On表达系统,研究HBX基因与慢性肝炎和原发性肝细胞肝癌(HCC)的发生和发展的关系。方法:用PCR方法扩增含MIuI和sall内切酶位点的X基因序列全长,对pTRE-2hys载体和X基因的PCR产物进行双酶切(MIul和sall内切酶),将两者连接,转化大肠杆菌DH5a并提取转化子pTRE-2hyg—HBX,对其进行测序及其RT—PCR功能学检测。结果:已构建的pTRE-2hyg—HB
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