蝉花蛋白提取方法比较

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目的:比较不同方法所提蝉花蛋白的浓度、数量和体外抗肿瘤活性,筛选最适蝉花蛋白提取方法。方法:采用六种方法提取蝉花中的总蛋白质,分别为Tris-HCl/饱和酚法(A法)、TCA/丙酮沉淀法(B法)、两步法(C法)、蜗牛酶酶解法(D法)、Tris-HCl提取法(E法)、磷酸盐缓冲液(PBS)提取法(F法),通过蛋白质浓度检测、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及体外抗人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤活性检测,比较不同提取方法对蛋白提取效果的影响。结果:从提取浓度来看,A法最优;从SDS-PAGE结果看,A法和B法即蛋白质沉淀法效果较好,条带丰度好且较清晰,C法条带丰度较好,但较模糊;从蛋白体外抗肿瘤活性结果看,C法、E法、F法的蛋白活性较高。结论:方法 A、B、C均适用于蝉花总蛋白的提取,但方法 A、B在制备过程中无法保持蝉花蛋白的生物活性,而方法 C即两步法提取的蝉花蛋白浓度较高、种类较多,体外抗MCF-7肿瘤活性也较强,为蝉花蛋白提取最适方法。
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