【摘 要】
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胆固醇是某些病原菌胞内生存所必需的碳源和能源物质,而胆固醇的各种代谢酶是潜在的药物作用靶点.烯酰辅酶A水合酶主要参与了脂肪酸的β-氧化循环,但其在胆固醇降解中的作用
【基金项目】
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国家自然科学基金(30671164), 四川省教育厅重点基金(14CZ003)资助项目
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胆固醇是某些病原菌胞内生存所必需的碳源和能源物质,而胆固醇的各种代谢酶是潜在的药物作用靶点.烯酰辅酶A水合酶主要参与了脂肪酸的β-氧化循环,但其在胆固醇降解中的作用机理尚不完全清楚.首先对耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis MC2155)进行了全基因组搜索,获得了18个烯酰辅酶A水合酶的候选基因.对在不同甾醇类化合物条件下的转录组测序结果进行了分析,发现18个候选基因差异表达明显,其中位于胆固醇降解基因簇中的MSMEG5915(ech A19),在胆固醇条件下表达明显上调,MSMEG5915(ech A19)可能参与了胆固醇的侧链降解.最后,构建了MSMEG5915的敲除质粒,并对耻垢分枝杆菌进行了基因转化.经PCR快速分子鉴定,MSMEG5915基因被同源整合于耻垢分枝杆菌染色体上.为进一步揭示MSMEG5915(ech A19)基因的功能奠定了基础.
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