蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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【摘要】

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克隆蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因PLMP,构建其原核表达载体后进行重组蛋白的表达及纯化,接种公兔制备多克隆抗体,以期为研究幼虫芽胞杆菌快速检测方法奠定基础。用PCR方法

【作者】

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葛婷何晓杰叶尔保勒阿斯喀·夏热甫汉雷程红

【机构】

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新疆农业大学动物医学学院,伊犁职业技术学院,伊犁出入境检验检疫局

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2018年5期

【关键词】

：

蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因原核表达多克隆抗体 Paenibacillus larvae of honeybee metalloprotease gen

【基金项目】

：

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目（2016D01B059）

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克隆蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因PLMP,构建其原核表达载体后进行重组蛋白的表达及纯化,接种公兔制备多克隆抗体,以期为研究幼虫芽胞杆菌快速检测方法奠定基础。用PCR方法扩增幼虫芽胞杆菌PLMP基因,扩增产物克隆至表达载体pGEX-4T-1并转化至E.coliBL21（DE3）感受态中。经不同的诱导时间、IPTG浓度诱导表达PLMP重组蛋白,经SDS-PAGE电泳切胶回收纯化目的蛋白。用目的蛋白对公兔进行4次免疫后,采集血清制备多抗。PCR扩增得到1 242bp的PLMP基因片段;构建原核表达载体pGEX

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