【摘 要】
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目的研究血小板衍生生长因子(PDGF-BB)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型转换时细胞骨架构象的改变,探讨PASMCs表型转换的机制。方法原代培养并鉴定SD大鼠PASMCs,将PASMC
【机 构】
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西南医科大学附属医院儿科; 四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院血管重构与发育缺陷实验室;
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目的研究血小板衍生生长因子(PDGF-BB)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型转换时细胞骨架构象的改变,探讨PASMCs表型转换的机制。方法原代培养并鉴定SD大鼠PASMCs,将PASMCs分为对照组(细胞不加诱导剂培养24h)、实验组(细胞用PDGF-BB 10ng/mL诱导培养24h);实时荧光定量PCR(RTqPCR)及Western blot检测细胞表型转化标志基因[α-肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α蛋白(SM22α)]mRNA及相关蛋白的表达;免疫荧光法检测细胞骨架微丝F-actin及微管α-tubulin、β-tubulin的构象;CCK-8法检测细胞增殖能力及划痕实验观察细胞迁移能力。结果与对照组相比,PDGF-BB下调α-SMA及SM22α表达水平;细胞骨架荧光强度明显减弱,F-actin排列紊乱、边缘不规则、呈毛刺样,α-tubulin、β-tubulin形态模糊,表现为共定位;明显增强PASMCs增殖与迁移能力。结论 PDGF-BB可能通过影响细胞骨架构象诱导PASMCs表型转换,进而改变细胞增殖及迁移能力。
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