【摘 要】
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目的 探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)基因对卵巢癌细胞SKOV3细胞对紫杉醇敏感性的影响.方法 体外设计合成针对RhoC基因的微小干扰RNA(miRNA),转染卵巢癌细胞SKOV3,应
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院妇产科,中国人民解放军第三○六医院妇产科
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目的 探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)基因对卵巢癌细胞SKOV3细胞对紫杉醇敏感性的影响.方法 体外设计合成针对RhoC基因的微小干扰RNA(miRNA),转染卵巢癌细胞SKOV3,应用RT-PCR和Western印迹方法检测转染前后基因mRNA和蛋白的变化,应用MTT方法检测干扰后SKOV3细胞对紫杉醇敏感性的变化,同时应用RT-PCR法检测转染前后SKOV3细胞中的凋亡基因Caspase-3、Survivin mRNA的表达水平.结果 转染针对RhoC基因的miRNA后24、48、72 h,SKOV3细胞mRNA和蛋白水平显著下降;关闭RhoC基因后,SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性显著提高.与单独使用紫杉醇相比,在RhoC-miRNA联合紫杉醇组中促进凋亡的基因Caspase-3明显增高,而抗凋亡蛋白Suvlvin mRNA水平显著降低.结论 RNA干扰RhoC基因能增加卵巢癌SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性,其协同机制可能与Caspase-3基因的上调,Suvivin基因的下调有关.
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