【摘 要】
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目的 探讨磷酸铝佐剂对乙型肝炎D N A疫苗诱导体液免疫应答的增强作用.方法应用基因重组技术构建乙型肝炎表面抗原(HBsAg)真核表达质粒pcDNA 3.1-S,经酶切和测序鉴定无误后,作为乙型肝炎D N A疫苗,将不同浓度的磷酸铝悬液与之混合后免疫小鼠;用酶联免疫吸附法检测重组质粒在小鼠局部肌肉中HBsAg的表达和在血清中HBsAg的含量;并于免疫小鼠6周后检测小鼠血清抗HBs水平.结果与单纯使
【机 构】
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510120,广州,广州医学院第一附属医院感染病科,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所
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目的 探讨磷酸铝佐剂对乙型肝炎D N A疫苗诱导体液免疫应答的增强作用.方法应用基因重组技术构建乙型肝炎表面抗原(HBsAg)真核表达质粒pcDNA 3.1-S,经酶切和测序鉴定无误后,作为乙型肝炎D N A疫苗,将不同浓度的磷酸铝悬液与之混合后免疫小鼠;用酶联免疫吸附法检测重组质粒在小鼠局部肌肉中HBsAg的表达和在血清中HBsAg的含量;并于免疫小鼠6周后检测小鼠血清抗HBs水平.结果与单纯使用质粒pcDNA 3.1-S相比,将质粒pcDNA 3.1-S与磷酸铝悬液混合后免疫小鼠,重组质粒在小鼠局部肌肉中HB sAg表达差异无显著性;HBsAg在血清中的浓度均为阴性.将质粒pcDNA 3.1-S与磷酸铝悬液混合后免疫小鼠,6周后检测小鼠血清抗-HBs,每1μl质粒中含1、10、50、1 00μg磷酸铝组,小鼠血清抗HBs抗体的P/N值分别为11.00±6.62、20.30±10.20、49.1 8±24.40和48.68±27.78,单纯使用质粒pcDNA3.1-S组P/N值为11.54±5.60.含1 μg和10 μg磷酸铝组,抗-HBs抗体P/N值与单纯用质粒pcDNA3.1-S组相比,差异无显著性;50μg和100μg磷酸铝组抗HBs抗体P/N值高于单纯用质粒pcDNA3.1-S组但50μg和100μg磷酸铝组二者差异无显著性.结论磷酸铝与质粒pcDNA3.1-S混合对pcDNA3.1-S在小鼠局部肌肉中HBsAg的表达无明显增强作用;但一定含量的磷酸铝能显著增强小鼠抗H B s应答水平;作为一种具有潜在应用价值的乙型肝炎D N A疫苗佐剂,值得进一步研究。
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