实时荧光定量PCR快速鉴别新型冠状病毒主要变异株

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为建立一种快速鉴别严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2) 的5种主要变异株的TaqMan探针实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, RT-qPCR) 体系,基于SARS-CoV-2野生型及变异株alpha (N501Y、HV69-70del)、beta (E484K、K417N)、gamma (K417T、V1176F)、delta (L452R、T478K) 和omicron (H655Y、N679K、P681H) 序列设计特异性引物、探针,建立和优化一种鉴别新型冠状病毒 (SARS-CoV-2) 5种主要变异株的TaqMan探针RT-qPCR方法,并进行该方法的特异性、敏感性、鉴别能力评价。该方法可准确区分出SARS-CoV-2野生型和突变型,与其他呼吸道病原体 (n=21) 无交叉,显示高特异性。该方法最低检测限为2×102拷贝/mL,操作简单、快速、成本廉价,可用于监测SARS-CoV-2毒株的变异,精准指导疫情识别与防控。
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