【摘 要】
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从猪(Sus scrofa)真核表达质粒pGM-CSF PCR扩增猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的编码序列,亚克隆到生长抑素真核表达质粒pcS/2SS中,构建GM-CSF与生长抑素(SS)基
【机 构】
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江西农业大学动物科技学院,南京农业大学动物繁育研究所,华中农业大学动物科技学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.30270959)资助
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从猪(Sus scrofa)真核表达质粒pGM-CSF PCR扩增猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的编码序列,亚克隆到生长抑素真核表达质粒pcS/2SS中,构建GM-CSF与生长抑素(SS)基因的融合表达质粒pGM-CSF/SS,酶切鉴定和DNA测序证明重组的融合表达质粒pGM-CSF/SS构建正确。选择30只小鼠(Mus musculus),随机分为3组,分别肌肉注射生理盐水(第1组)、pcS/2SS(第2组)和pGM-CSF/SS(第3组),剂量50μg/只,2周后以相同剂量加强免疫1次,研究pGM-CSF/SS对小鼠的免疫效果。结果表明,GM-CSF可增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖能力,以pGM-CSF/SS组增殖能力最强,分别比对照组和pcS/2SS提高8.4%(P<0.05)。pcS/2SS和pGM-CSF/SS免疫小鼠生长抑素抗体P(阳性)/N(阴性)值均有所提高,且pGM-CSF/SS组P/N值高于pcS/2SS组。生长抑素抗体阳性鼠的比例以pGM-CSF/SS为最高,达60%,pcS/2SS组为30%,对照组没有出现阳性鼠。GM-CSF对生长抑素DNA疫苗有一定的免疫增强作用,可增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖能力,提高生长抑素抗体的P/N值。
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