【摘 要】
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目的探讨人皮下、网膜脂肪组织来源的前脂肪细胞形态、功能的差异，观察不同浓度甘精胰岛素对其增殖、分化的影响。方法胶原酶分离法原代培养人皮下、网膜前脂肪细胞，倒置显微镜下观察不同来源的人前脂肪细胞在形态方面的差异，不同浓度甘精胰岛素（20、200、500、1000、1500 nmol/L）干预其增殖及分化过程，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测二者增殖的差异，实时定量PCR检测脂肪分化相关基因表达的差异。
【机 构】
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519000珠海,中山大学附属第五医院内分泌科,中山大学附属第三医院内分泌科,中山大学附属第三医院内分泌科,中山大学附属第三医院内分泌科,中山大学附属第三医院内分泌科
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目的探讨人皮下、网膜脂肪组织来源的前脂肪细胞形态、功能的差异，观察不同浓度甘精胰岛素对其增殖、分化的影响。
方法胶原酶分离法原代培养人皮下、网膜前脂肪细胞，倒置显微镜下观察不同来源的人前脂肪细胞在形态方面的差异，不同浓度甘精胰岛素（20、200、500、1000、1500 nmol/L）干预其增殖及分化过程，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测二者增殖的差异，实时定量PCR检测脂肪分化相关基因表达的差异。
结果（1）可从人皮下、网膜脂肪组织分离出前脂肪细胞，并在体外扩增，皮下前脂肪细胞更细长，容易增殖，而网膜前脂肪细胞呈多角形，易于老化。（2）MTT法结果显示甘精胰岛素抑制网膜前脂肪细胞的体外增殖，且其抑制作用具有剂量依赖性，1000 nmol/L干预72 h后，与未加胰岛素组相比，网膜前脂肪细胞的增殖明显低[吸光度（A）值：0.144±0.021比0.267±0.040，P<0.01]；皮下前脂肪细胞作用不明显（A值：0.305±0.045比0.350±0.037，P>0.05）。（3）500 nmol/L的胰岛素浓度是人前脂肪细胞分化的适宜浓度，PCR结果显示该浓度时，对于皮下前脂肪细胞，脂肪分化的标志基因过氧化物酶增殖物激活受体（PPAR）γ（F=31.31，P<0.01）和CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）mRNA表达最高（F=9.86，P<0.05)，前脂肪细胞的标志基因Pref-1表达最低（皮下F=68.95，P<0.01；网膜F=30.38，P<0.01)，但是胰岛素浓度对网膜脂肪细胞PPARγ、C/EBPαm RNA影响不大（均P>0.05）。
结论甘精胰岛素可抑制人网膜前脂肪细胞的增殖，促进皮下、网膜前脂肪细胞的分化。
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