【摘 要】
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目的 研究miR-3177-3p通过TLR4对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的支气管上皮细胞凋亡的影响.方法 支气管上皮细胞16HBE分成Control组、CSE组(CSE处理)、CSE+miR-NC组(转染mimics control,CSE处理)、CSE+miR-3177-3p组(转染miR-3177-3p mimics,CSE处理),Realtime PCR方法检测miR-3177-3p的表达,利用流式细胞术测定细胞凋亡情况,采用Western blot方法测定Bax、Bcl-2、TLR4蛋白水平,采
【机 构】
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226600 江苏省海安市人民医院呼吸内科
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目的 研究miR-3177-3p通过TLR4对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的支气管上皮细胞凋亡的影响.方法 支气管上皮细胞16HBE分成Control组、CSE组(CSE处理)、CSE+miR-NC组(转染mimics control,CSE处理)、CSE+miR-3177-3p组(转染miR-3177-3p mimics,CSE处理),Realtime PCR方法检测miR-3177-3p的表达,利用流式细胞术测定细胞凋亡情况,采用Western blot方法测定Bax、Bcl-2、TLR4蛋白水平,采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量,采用黄嘌呤氧化法检测SOD水平,采用比色法检测GSH-Px水平.在支气管上皮细胞16HBE中转染miR-3177-3p mimics、pcDNA-TLR4,用CSE处理,利用上述方法检测细胞凋亡和Bax、Bcl-2、TLR4蛋白水平以及MDA、SOD、GSH-Px水平.结果 与Control组比较,CSE组支气管上皮细胞中miR-3177-3p表达水平降低,细胞凋亡率升高,细胞中Bax、TLR4蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,MDA水平升高,SOD、GSH-Px水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).与CSE+miR-NC组比较,CSE+miR-3177-3p组支气管上皮细胞中miR-3177-3p表达水平升高,细胞凋亡率降低,细胞中Bax、TLR4蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,MDA水平降低,SOD、GSH-Px水平升高,差异有统计学意义(P<0.05).pcDNA-TLR4逆转上调miR-3177-3p对CSE诱导的支气管上皮细胞凋亡和Bax、Bcl-2、TLR4蛋白水平以及MDA、SOD、GSH-Px水平影响.结论 上调miR-3177-3p通过TLR4抑制CSE诱导的支气管上皮细胞凋亡.
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