【摘 要】
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目的 探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的可行性,观察NSCs中Nestin基因mRNA的表达情况.方法 采用密度梯度离心法从人脐血中分离出UBC-MNCs
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目的 探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的可行性,观察NSCs中Nestin基因mRNA的表达情况.方法 采用密度梯度离心法从人脐血中分离出UBC-MNCs,用含人表皮细胞生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs增殖分化及形态学特点;免疫组织化学法检测培养细胞中神经细胞标志抗原巢蛋白Nestin、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT·PCR法检测诱导前后培养细胞中Nestin mRNA的表达变化.结果 UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,形成典型NSCs克隆团,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原蛋白,诱导前细胞Nestin、NSE、GFAP的表达均非常低,诱导6 d时Nestin阳性细胞数达高峰,然后开始下降,NSE、GFAP阳性细胞数逐渐增高.Brdu标记靶细胞阳性率达90%.Nestin mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导3 d、6 d、9 d、12 d时表达逐渐升高(P
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