【摘 要】
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在P.pastoris中分泌表达非融合抗HBsAg单链抗体(HBscFv).设计引物从pGEM-HBscFv上扩增目的基因,亚克隆至P.pastoris表达载体pPICZαA中,线性化后转化P. pastoris GS115;转化
【机 构】
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暨南大学生物医药研究开发基地,解放军458医院全军传染病中心
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在P.pastoris中分泌表达非融合抗HBsAg单链抗体(HBscFv).设计引物从pGEM-HBscFv上扩增目的基因,亚克隆至P.pastoris表达载体pPICZαA中,线性化后转化P. pastoris GS115;转化子经菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定后,甲醇诱导目的蛋白表达.结果发现,重组HBscFv可以在α因子的引导下,分泌至培养基中,产量为80mg/L;分泌至培养基中的HBscFv具有结合HBsAg活性,活性总量在诱导培养72h后达最高峰,在诱导培养后期,HBscFv活性下降
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