肺组织标本荧光定量PCR内参基因精确性鉴定

来源 :肿瘤研究与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wlj190151
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目的 分析比较广泛应用的内参基因β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)和β2-微球蛋白(β 2-M)在中国人的肺癌组织及正常肺组织中的表达稳定性.方法 采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)检测这3个看家基因在20例肺癌组织及相应癌旁正常肺组织中的表达情况,并用两款国际通用的内参基因筛选软件GeNorm和NormFinder分析其稳定性.结果 GAPDH在组内及组间的表达差异均最大[肿瘤与正常组内标准差(s)分别为1.07和0.93;|△Ct|=2.01±1.06;P=0.000].用两个软件分析均以3个基因的平均值做内参最为稳定,但t检验结果显示以GUSB和β2-M二者平均值作为内参的组内及组间表达差异最小,并且是唯一一个组合在肿瘤和正常组间差异无统计学意义(肿瘤与正常组内s分别为0.53和0.79;|△Ct|=0.73±0.53;P=0.053).结论 3个看家基因均不适于单独作为肺组织荧光定量PCR检测的内参;GUSB和β2-M的均值是这3个基因不同组合中作为肺组织标本内参的最好选择.
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