【摘 要】
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采用超过滤、PEG沉淀和超速离心综合步骤对MT-5细胞培养上清中的HBsAg进行纯化。所得纯化HBsAg经SDS-PAGE银染色结果显示两条多肽,分子量分别为23k和27k,与血源HBsAg的多肽成
【机 构】
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中山医科大学附属第三医院肝炎研究室,中山医科大学附属第三医院肝炎研究室,中山医科大学附属第三医院生物化学教研室 研究生,南京铁道医学院传染病学教研室
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采用超过滤、PEG沉淀和超速离心综合步骤对MT-5细胞培养上清中的HBsAg进行纯化。所得纯化HBsAg经SDS-PAGE银染色结果显示两条多肽,分子量分别为23k和27k,与血源HBsAg的多肽成分相同,为重组HBsAg的两条特异性多肽,且在凝胶中无其它杂蛋白带存在,纯度高。经PAGE银染色结果证实纯HBsAg中的杂蛋白含量符合疫苗生产的要求。经此综合方法提纯的HBsAg回收率可达44.1％以上。
The HBsAg in MT-5 cell culture supernatant was purified by ultrafiltration, PEG precipitation and ultracentrifugation. The resulting purified HBsAg showed two polypeptides with molecular weights of 23k and 27k by SDS-PAGE, respectively. The two peptides were the same as those of HBsAg from blood, and they were two specific peptides of recombinant HBsAg with no other hybrid proteins in the gel With the presence of high purity. PAGE silver staining results confirmed that the pure HBsAg in the protein content in line with the vaccine production requirements. After this comprehensive method of purification of HBsAg recovery rate of up to 44.1%.
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