目的 以MYCN基因正常扩增神经母细胞瘤细胞株为研究对象,增强其MYCN基因的表达,观察其后细胞凋亡改变,及对常用化疗药物敏感性的影响,为临床治疗神经母细胞瘤开辟新思路.方法 克隆MYCN基因,构建MYCN高表达载体；转染神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH,增强MYCN表达后,使用ELISA法检测细胞凋亡情况；Western-blot法检测Bcl-2、Bcl-xL、Bak、Bax、Bid 表达变化；ELISA法检验MYCN表达增强后长春新碱、阿霉素、顺铂对肿瘤细胞凋亡的诱导情况.结果 构建pcDNA3.1(+)-MYCN载体可表达N-Myc蛋白.Western-blot显示被转染SK-N-SH 细胞中MYCN基因表达与对照组比较显著强化(1.26±0.12 vs.0.58±0.06,P＜0.05).表达增强后与对照组比较肿瘤细胞凋亡增加(2.11±0.23 vs.1.32±0.15,P＜0.05),Bid表达增高(1.53±0.07 vs.0.69±0.04,P＜0.05),Bcl-2表达降低(1.66±0.09 vs.1.97±0.11,P＜0.05)、Bcl-xL表达降低(1.57±0.08 vs.1.93±0.12,P＜0.05),Bak (1.51±0.07 vs.1.53±0.08)、Bax( 1.35±0.06vs.1.32±0.06)表达尢变化(P＞0.05).MYCN表达增强24 h后,长春新碱(19.55±1.99 vs.18.42±1.98)、阿霉素(11.65±0.93 vs.6.22±0.43)、顺铂(8.70±0.84 vs.6.83±0.65)诱发肿瘤细胞凋亡显著增加(P＜0.05).结论 外源性增强神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH中MYCN基因的表达引起肿瘤细胞凋亡增强；对阿霉素,长春新碱,顺铂的敏感性增强；MYCN表达增强可能是通过抑制Bcl-2,Bcl-xL,增强Bid表达促进肿瘤细胞凋亡。
外源性MYCN基因表达增强神经母细胞瘤凋亡及化疗敏感性
【摘 要】
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目的 以MYCN基因正常扩增神经母细胞瘤细胞株为研究对象,增强其MYCN基因的表达,观察其后细胞凋亡改变,及对常用化疗药物敏感性的影响,为临床治疗神经母细胞瘤开辟新思路.方法 克隆MYCN基因,构建MYCN高表达载体；转染神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH,增强MYCN表达后,使用ELISA法检测细胞凋亡情况；Western-blot法检测Bcl-2、Bcl-xL、Bak、Bax、Bid 表达变化；
【机 构】
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200092上海交通大学医学院附属新华医院小儿外科,200092上海交通大学医学院附属新华医院小儿外科,200092上海交通大学医学院附属新华医院小儿外科,200092上海交通大学医学院附属新华医院小
【出 处】
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中华小儿外科杂志
【发表日期】
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2012年33期
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