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单核细胞增生李斯特菌（简称单增李斯特菌）为革兰染色阳性菌，在人类与动物生活环境中均广泛分布，为人畜共患病原菌。李斯特菌溶血素O（LLO，由hly编码）作为李斯特菌重要毒力因子主要在细菌裂解并逃逸吞噬体中起作用，但其潜在的分子机制尚待深入解析。以单增李斯特菌EGD-e为参考菌株，通过PCR分别扩增hly基因的上、下游同源臂序列（各约500bp），选用SOEPCR方法将同源臂整合连接成融合片段。经BarnHI／Sal工酶切、连接后克隆至李斯特菌温敏型穿梭质粒pKSV7中得到重组质粒pSL081，测序验证后电转