重组果蝇Merlin蛋白的表达与纯化

来源 :南开大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ni00ni
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NF2基因的的缺失会导致Ⅱ型多发性神经纤维瘤的发生.NF2又称Merlin,和ERM蛋白家族成员类似,Merlin蛋白N端的FERM结构域与C端的CTD结构域存在分子内的相互作用,从而形成一种自抑制的闭合构象;当Merlin蛋白N、C端分子内的相互作用被破坏时,能释放出N端的FERM结构域,从而能与许多效应因子相互作用,形成一种伸展的打开的构象.果蝇Merlin蛋白的N、C端分子内的相互作用比人源Merlin更强,其构象的调节机制还不是很清楚.构建了原核表达质粒pET-28a-His6-sumo-Merlin,通过大肠杆菌表达系统表达出了可溶性的重组果蝇Merlin蛋白,通过镍柱亲和层析,凝胶过滤层析获得了纯度较高、构象均一的重组蛋白Merlin.而且,还利用分析型超速离心分析了重组蛋白Merlin的构象,为进一步研究Merlin蛋白的三维结构及其构象的调节机制提供了一定的基础.
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