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应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选HBV XTP12蛋白反式激活基因的上调基因

来源 :传染病信息 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fossi

【摘 要】

：

目的克隆并筛选乙型肝炎病毒（HBV）反式激活基因XTP12的上调基因，了解其可能存在的调节功能。方法应用抑制性消减杂交技术克隆并筛选XTP12反式激活的新型靶基因。以XTP12表达质粒

【作 者】

：

宫嫚 成军 刘妍 纪冬 李筠 

【机 构】

：

解放军第三0二医院,北京市地坛医院

【出 处】

：

传染病信息

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

乙型肝炎病毒 X蛋白 反式激活 抑制性消减杂交 hepatitis B virus  X protein  transaetivation  suppressi 

【基金项目】

：

北京市自然科学基金（5042024）

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目的克隆并筛选乙型肝炎病毒（HBV）反式激活基因XTP12的上调基因，了解其可能存在的调节功能。方法应用抑制性消减杂交技术克隆并筛选XTP12反式激活的新型靶基因。以XTP12表达质粒pcDNA3．1（-）-XTP12转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1（-）为平行对照，制备转染后的细胞裂解液，提取mRNA并逆转录为eDNA，经Rsa Ⅰ酶切后，将实验组eDNA分成2组，分别与2种不同的接头衔接，再与对照组eDNA进行2次消减杂交及2次抑制性聚合酶链反应（PCR），将产物与pGEM—Teasy载体

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