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目的：克隆小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因并构建小鼠甲胎蛋白-细胞毒性T淋巴细胞抗原4(mAFP—CTLA4)融合蛋白真核表达载体．方法：从Hepal-6细胞中提取总RNA进行RT—PCR，扩增出mAFP基因，亚克隆于pcDNA3．1载体．PCR法从质粒pmCTLA4-Ig中克隆出mCTLA4膜外部分基因并通过重叠PCR法添加接头，重组连接于pmAFP质粒中mAFP基因后，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆酶切、测序鉴定．用质粒瞬时转染CHO细胞，Western blot检测融合蛋白的表达．结果：利用RT—P