刺参管足SMART cDNA文库构建及EST分析

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaopingchina99
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以大连广鹿岛野生刺参的管足mRNA为材料,利用SMART cDNA Construction Kit构建了表达型cDNA文库。初始文库的滴度为1.3×106PFU/mL,蓝白斑估测重组率合格。扩增后获得96 mL文库,滴度为1.8×1010PFU/mL,从扩增文库中随机挑取200个噬菌斑进行PCR检测,电泳检测结果表明重组率大于90%,片段大小在0.25-2.0 kb之间的插入片段占80.4%,文库构建成功。随机选择122个噬菌斑转化为质粒pTriplEx2并测序,测序成功率83.6%
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