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【摘 要】 目的 探析不同软化方法对白芍饮片质量的影响，以选择最优的白芍饮片加工方法。方法 采用蒸、煮、闷润、减压冷浸、浸泡5种软化方法制得白芍饮片，并采用HPLC对饮片中芍药苷和芍药内酯苷含量进行测定。结果 5种软化方式下所得白芍饮片中芍药内酯苷和芍药苷的含量排序均为：闷润>蒸>煮>减压冷浸>浸泡。结论 闷润、蒸两种软化方法下白芍饮片质量较好，优于其他软化方法。
【关键词】 白芍 芍药苷 软化 HPLC
白芍为芍药的干燥根，具有养血敛阴、平抑肝阳、柔肝止痛的功效，白芍的指标性成分主要为芍药苷和芍药内酯苷。在加工过程中，不同的软化及炮制方法会影响白芍中药效成分的差异[1]。本研究通过分析蒸、煮、闷润、减压冷浸、浸泡5种不同软化方法制得白芍对其指标性成分的影响，旨在为选择最优的白芍饮片加工方法提供依据，现报道如下。
1 仪器与材料
1.1 仪器
采用日本岛津生产的LC-2010A型高效液相色谱仪，上海精宏实验设备有限公司生产的电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9076A 型），北京 SARTORIUS 有限公司生产的BS210S 型 1 /万电子天平，上海实验仪器厂的ZK82A 型真空干燥箱。
1.2 材料
采用安徽亳州市万珍中药饮片厂生产的白芍药材，并经权威机关鉴定为毛茛科植物芍药的干燥根；选用中国药品生物制品检定所提供的芍药苷作为对照品，纯度96.5%，批号110736-201035；天津马克生物技术有限公司提供的芍药内酯苷对照品，纯度> 98%，批号 10371-201005；水为双蒸水，乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
1.3 方法
1.3.1 制备白芍饮片。将白芍药材分成等质量的5份，分别采用蒸、浸泡、闷润、煮、减压冷浸等5种方法进行软化。制成的白药饮片置入50℃烘箱中干燥12h后取出，并标注所采用的软化方法，备用。①蒸法：用已圆气蒸锅将白芍药材蒸1 h后取出，然后趁热切片；②浸泡法：将药材放入大烧杯中，加水100 mL，药材完全浸入水中浸泡36h后取出，切片；③闷润法：将白芍药材平铺到托盘中，用水润湿纱布将药材包裹48h后取出，切片；④煮法：用煮沸的水将白芍药材煮30min，取出，切片；⑤减压冷浸法：将白芍药材置入大烧杯中， 加200mL水，杯口用保鲜膜封住，并适当露出空隙，然后置入<-0.08 Mpa、25℃的减压干燥箱12 h[2]，取出，切片。
1.3.2 测定芍药苷、芍药内酯苷的含量 ①制备对照品溶液：取适量芍药苷和芍药内酯，精密称定后加甲醇，使之浓度为32 mg·L-1；②制备供试品溶液：将待测饮片粉碎后过4号筛，用天平秤精密称取0.2g，置入锥形瓶，然后加50mL75%乙醇，质量经精密称定后超声提取30min，冷却后再精密称定质量，如质量减失则用75% 乙醇补充，摇匀后过滤，取续滤液。③进行精密度试验、重复性试验、稳定性试验、加样回收试验和样品测定等操作，获得不同软化方法白芍饮片的芍药内酯苷及芍药苷的含量。
1.4 数据处理方法
本研究数据采用SPSS19.0统计学软件处理分析，计数资料采用（x±s）表示，配对资料采用t检验；计数资料采用X2检验。多重比较采用方差分析，以P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
5种软化方式下所得白芍饮片中芍药内酯苷和芍药苷的含量排序均为：闷润>蒸>煮>减压冷浸>浸泡；闷润法分别与浸泡法、减压冷浸法所得芍药苷指标比较，均有统计学差异（*P<0.05）；与蒸、煮法比较差异无统计学意义（#P>0.05）；闷润法分别与浸泡法、煮法、减压冷浸法所得芍药内酯苷指标比较，差异均有统计学意义（*P<0.05）；与蒸法比较差异无统计学意义（#P>0.05），详见表1。
表1 不同软化方法对白芍饮片质量的影响（n=3）
注：*，与闷润法所得指标比较，P<0.05，#，与闷润法所得指标比较，P>0.05。
3 讨论
研究文献显示[3]，白芍中所含化学成分主要为三萜及其苷类、单萜及其苷类、糖类、鞣质类、黄酮类等。2010 年版《中国药典》中仅以芍药苷为指标[4]，采用高效液相色谱（HPLC）法为定量方法和薄层色谱法为定性研究，以此对白芍的质量进行控制，其优点为操作相对简便且方法成熟，但缺点是无法全面反映白芍质量。随着科学技术的发展，控制白芍质量的方法也有了新进展，目前，已有采用HPLC 法同时测定白芍中芍药苷和芍药苷内酯的量，即用一测多评法来控制白芍的质量。本研究即采用了此法。
本研究结果显示，以芍药内酯苷和芍药苷的含量为指标，闷润法>蒸法，但其间差异无统计学差异，而与减压冷浸、浸泡法所得饮片的指标相比，均明显高于后者（P<0.05），这说明软化时所用水量越大，其有效成分的丢失越严重，这与传统中药的“少泡多浸”原则基本一致。相对于蒸法、煮法，闷润耗时相对较长，而蒸法、煮法操作则较复杂，因此，白芍饮片生产厂家要根据自己的实际情况选取合适的软化方法。
本试验采用HPLC法，针对不同软化方法所得的白芍饮片中所含的芍药苷和芍药内酯苷进行测定，相比于以往单一对芍药苷成分测定的方法，更全面反应了不同软化方法下白芍饮片质量状况。
综上，闷润、蒸两种软化方法下白芍饮片质量较好，优于其他软化方法。
参考文献
[1]李凯，周宁，张振凌，石方方.不同软化方法对白芍中芍药苷含量的影响[J].光明中医，2012，27（4）：826-827.
[2]杨勇帮，李伟，张海化.影响白芍饮片芍药苷含量因素的探讨研究[J].云南中医中药杂志，2014，35（10）：75-77.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S]. 2010 版.北京：中国医药科技出版社，2010：1.
[4]李伟铭，赵月然，杨燕云，等 . HPLC 波长切换法同时测定白芍饮片中9个成分的含量 [J]. 药物分析杂志，2011，31（12）： 2208.
【关键词】 白芍 芍药苷 软化 HPLC
白芍为芍药的干燥根，具有养血敛阴、平抑肝阳、柔肝止痛的功效，白芍的指标性成分主要为芍药苷和芍药内酯苷。在加工过程中，不同的软化及炮制方法会影响白芍中药效成分的差异[1]。本研究通过分析蒸、煮、闷润、减压冷浸、浸泡5种不同软化方法制得白芍对其指标性成分的影响，旨在为选择最优的白芍饮片加工方法提供依据，现报道如下。
1 仪器与材料
1.1 仪器
采用日本岛津生产的LC-2010A型高效液相色谱仪，上海精宏实验设备有限公司生产的电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9076A 型），北京 SARTORIUS 有限公司生产的BS210S 型 1 /万电子天平，上海实验仪器厂的ZK82A 型真空干燥箱。
1.2 材料
采用安徽亳州市万珍中药饮片厂生产的白芍药材，并经权威机关鉴定为毛茛科植物芍药的干燥根；选用中国药品生物制品检定所提供的芍药苷作为对照品，纯度96.5%，批号110736-201035；天津马克生物技术有限公司提供的芍药内酯苷对照品，纯度> 98%，批号 10371-201005；水为双蒸水，乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
1.3 方法
1.3.1 制备白芍饮片。将白芍药材分成等质量的5份，分别采用蒸、浸泡、闷润、煮、减压冷浸等5种方法进行软化。制成的白药饮片置入50℃烘箱中干燥12h后取出，并标注所采用的软化方法，备用。①蒸法：用已圆气蒸锅将白芍药材蒸1 h后取出，然后趁热切片；②浸泡法：将药材放入大烧杯中，加水100 mL，药材完全浸入水中浸泡36h后取出，切片；③闷润法：将白芍药材平铺到托盘中，用水润湿纱布将药材包裹48h后取出，切片；④煮法：用煮沸的水将白芍药材煮30min，取出，切片；⑤减压冷浸法：将白芍药材置入大烧杯中， 加200mL水，杯口用保鲜膜封住，并适当露出空隙，然后置入<-0.08 Mpa、25℃的减压干燥箱12 h[2]，取出，切片。
1.3.2 测定芍药苷、芍药内酯苷的含量 ①制备对照品溶液：取适量芍药苷和芍药内酯，精密称定后加甲醇，使之浓度为32 mg·L-1；②制备供试品溶液：将待测饮片粉碎后过4号筛，用天平秤精密称取0.2g，置入锥形瓶，然后加50mL75%乙醇，质量经精密称定后超声提取30min，冷却后再精密称定质量，如质量减失则用75% 乙醇补充，摇匀后过滤，取续滤液。③进行精密度试验、重复性试验、稳定性试验、加样回收试验和样品测定等操作，获得不同软化方法白芍饮片的芍药内酯苷及芍药苷的含量。
1.4 数据处理方法
本研究数据采用SPSS19.0统计学软件处理分析，计数资料采用（x±s）表示，配对资料采用t检验；计数资料采用X2检验。多重比较采用方差分析，以P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
5种软化方式下所得白芍饮片中芍药内酯苷和芍药苷的含量排序均为：闷润>蒸>煮>减压冷浸>浸泡；闷润法分别与浸泡法、减压冷浸法所得芍药苷指标比较，均有统计学差异（*P<0.05）；与蒸、煮法比较差异无统计学意义（#P>0.05）；闷润法分别与浸泡法、煮法、减压冷浸法所得芍药内酯苷指标比较，差异均有统计学意义（*P<0.05）；与蒸法比较差异无统计学意义（#P>0.05），详见表1。
表1 不同软化方法对白芍饮片质量的影响（n=3）
注：*，与闷润法所得指标比较，P<0.05，#，与闷润法所得指标比较，P>0.05。
3 讨论
研究文献显示[3]，白芍中所含化学成分主要为三萜及其苷类、单萜及其苷类、糖类、鞣质类、黄酮类等。2010 年版《中国药典》中仅以芍药苷为指标[4]，采用高效液相色谱（HPLC）法为定量方法和薄层色谱法为定性研究，以此对白芍的质量进行控制，其优点为操作相对简便且方法成熟，但缺点是无法全面反映白芍质量。随着科学技术的发展，控制白芍质量的方法也有了新进展，目前，已有采用HPLC 法同时测定白芍中芍药苷和芍药苷内酯的量，即用一测多评法来控制白芍的质量。本研究即采用了此法。
本研究结果显示，以芍药内酯苷和芍药苷的含量为指标，闷润法>蒸法，但其间差异无统计学差异，而与减压冷浸、浸泡法所得饮片的指标相比，均明显高于后者（P<0.05），这说明软化时所用水量越大，其有效成分的丢失越严重，这与传统中药的“少泡多浸”原则基本一致。相对于蒸法、煮法，闷润耗时相对较长，而蒸法、煮法操作则较复杂，因此，白芍饮片生产厂家要根据自己的实际情况选取合适的软化方法。
本试验采用HPLC法，针对不同软化方法所得的白芍饮片中所含的芍药苷和芍药内酯苷进行测定，相比于以往单一对芍药苷成分测定的方法，更全面反应了不同软化方法下白芍饮片质量状况。
综上，闷润、蒸两种软化方法下白芍饮片质量较好，优于其他软化方法。
参考文献
[1]李凯，周宁，张振凌，石方方.不同软化方法对白芍中芍药苷含量的影响[J].光明中医，2012，27（4）：826-827.
[2]杨勇帮，李伟，张海化.影响白芍饮片芍药苷含量因素的探讨研究[J].云南中医中药杂志，2014，35（10）：75-77.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S]. 2010 版.北京：中国医药科技出版社，2010：1.
[4]李伟铭，赵月然，杨燕云，等 . HPLC 波长切换法同时测定白芍饮片中9个成分的含量 [J]. 药物分析杂志，2011，31（12）： 2208.