人可溶性CD40L cDNA的克隆及表达

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目的:利用基因技术克隆CD40L分子的胞外区184~831片断cDNA,构建其原核表达载体,从而建立原核表达体系.方法:采用RT-PCR方法从人扁桃体的总RNA中扩增CD40L分子184~831片断的cDNA,以限制性酶切和DNA测序进行鉴定,并将目的片断克隆至原核表达载体pET-28a+,让重组质粒在BL21中表达,利用Western blot鉴定目的蛋白.结果:克隆到人sCD40L分子184~831片断的cDNA,DNA测序结果与报道的完全一致;构建了该片断的原核表达载体,且目的蛋白能在BL21中表达
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