慢病毒及脂质体法转染原代软骨细胞的实验研究

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目的利用慢病毒载体及Lipofectamine 2000脂质体转染大鼠原代软骨细胞,探讨转染软骨细胞的理想条件。方法采用机械—酶消化法获取原代软骨细胞,经Ⅱ型胶原(ColⅡ)鉴定后,使用慢病毒载体介导GFP及利用Lipofectamine 2000介导的FAM-siRNA分别转染原代软骨细胞,倒置荧光显微镜检测转染效率,MTT法测定原代软骨的增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果采用脂质法转染软骨细胞不理想,转染率不到10%。运用慢病毒载体后转染率明显高于脂质体法,且随感染复数(病毒滴度×病毒
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