狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用

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目的以狂犬病病毒P蛋白作为检测抗原,用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)LEP—Flury株的基因序列设计引物,通过RT—PCR扩增出P基因的全长序列,克隆于pGM—T载体中,获得重组质粒pGM—T—P,将重组质粒用限制性内切酶NotI和EcoRI进行双酶切,酶切产物定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核重组表达质粒pET-32a—P,阳性重组质粒转化原核表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS—P
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