【摘 要】
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目的构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用。方法将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelpe
【机 构】
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贵阳医学院检验系,北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室
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目的构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用。方法将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelper质粒共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装。收获并纯化病毒,感染模型细胞HepG2.215,采用ELISA法和荧光定量PCR法检测包装的rAAV-shRNA-GFP病毒抑制HBV情况。结果经酶切及测序证实,rAAV载体质粒pAAV-shRNA-GFP构建成功,包装的rAAV-shRNA-GFP病
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