【摘 要】
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目的 对血清中HBV DNA不同抽提方法进行比较,选择较优方法进行隐匿性HBV感染的检测.方法 分别用直接煮沸法、辛酸钠法、蛋白酶K消化-酚-氯仿法、PEG8000法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法、柱抽提法,抽提血清中HBV DNA,比较各方法对PCR检测HBV DNA得率的影响,并在得率较高的方法中进行灵敏度、重复性的比较.采用辛酸钠法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法处理单一抗-HBc阳性血清并进
【机 构】
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276800,日照市中医医院感染科,276800,日照市中医医院感染科,276800,日照市中医医院感染科,030001,太原,山西医科大学第一临床医学院感染科,030001,太原,山西医科大学第一临
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目的 对血清中HBV DNA不同抽提方法进行比较,选择较优方法进行隐匿性HBV感染的检测.方法 分别用直接煮沸法、辛酸钠法、蛋白酶K消化-酚-氯仿法、PEG8000法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法、柱抽提法,抽提血清中HBV DNA,比较各方法对PCR检测HBV DNA得率的影响,并在得率较高的方法中进行灵敏度、重复性的比较.采用辛酸钠法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法处理单一抗-HBc阳性血清并进行套式PCR.结果 辛酸钠-酚-氯仿法HBV DNA得率最高,辛酸钠法、碱裂解法、直接煮沸法、柱抽提法得率次之,蛋白酶K消化-酚-氯仿法及PEG8000法得率较低.辛酸钠-酚-氯仿法有较高的灵敏度,较好的重复性.在单一抗-HBc阳性血清中,辛酸钠-酚-氯仿法、辛酸钠法和碱裂解法的HBV DNA检测阳性率分别为35%、25%和20%.结论 核酸抽提方法的不同直接影响HBV的PCR检测灵敏度.辛酸钠-酚-氯仿法在隐匿性HBV DNA检测中有较好的效果。
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