【摘 要】
：
根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 美洲株 ATCC VR2332 的 N 蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从PRRSV Hn-1/06株中克隆了大小为372 bp的 N 蛋白
论文部分内容阅读
根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 美洲株 ATCC VR2332 的 N 蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从PRRSV Hn-1/06株中克隆了大小为372 bp的 N 蛋白基因(EU025136).将 N 蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-N,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为33 000的可溶性融合蛋白N-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的29%.将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300 mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达,91%.用Western blotting分析纯化后的融合蛋白,显示良好的生物学活性.利用纯化融合蛋白作包被抗原及优化ELISA反应条件,建立了可检测抗PRRSV N 蛋白抗体的间接ELISA方法(N-ELISA),并将所建立的N-ELISA与国外进口的PRRS检测试剂盒IDEXX-ELISA对200份临床送检血清进行平行检测,阳性符合率为92.7%.结果表明,本试验建立的N-ELISA与IDEXX-ELISA具有同样高的特异性.
其他文献
近年来，随着国民经济的较快发展和城市化进程的不断推进，城市空间和外延在持续扩大。市政工程管理是保证工程质量的重要环节，可是实际的施工过程中会遇到很多问题，本文根据市政工
当今时代，科技飞速发展，日新月异的消费不断涌进人们的生活，带给人们全新的生活方式。而这一切的源头—生产领域，生产及其配套设施设备（以下简称设备）技术更是急速发展，不断走向集成
现如今，我国的市场经济在不断的发展，城市化也在不断的完善，在城市的施工阶段所涉及到的排水系统，在施工的过程中得到了严格的关注。市政工程排水的施工技术都会对施工的质量、效
近年来,铬渣治理项目受到人民群众广泛关注,笔者结合企业铬渣无害化处理工程运行实际经验、同行业铬渣治理运行实施现状及文献查阅,对比国内外工艺技术路线,分析各工艺路线优
目的:观察阿托伐他汀短期干预对血脂异常兔血清及脂肪组织分泌脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)的影响,并阐明其可能机制。方法:15只新西兰大白兔随机均分为3组:①对照组,给
黄酮类化合物广泛存在于动植物中,具有多种生理活性,黄酮合酶I基因可以催化多种黄酮类化合物的生物合成.根据NCBI已登录的其他物种黄酮合酶I基因的氨基酸序列,与家蚕基因组和
试验以平均体质量约27 g的斑点叉尾(鱼回)为试验鱼,1 200尾试验鱼,分为5个组,每组8个重复,每重复30尾鱼,分别在饲料中加入0.250、500、750和1 000 mg/kg的专利植物提取物,正
通过移植和孢子繁殖试验,研究了生态因子对粤东地区水蕨生长的影响,结果表明,水蕨生长具有季节性变化,4-6月是水蕨生长高峰期,6月和12月开始形成孢子;水蕨孢子萌发和孢子体的
地理标志产品--瓯柑[GB/T 22442-2008]于2009年1月1日颁布实施.通过规定瓯柑果实质量指标,规划种植气候与土壤环境要求,提出苗木质量、优质安全栽培以及果实采收贮存技术措施
通过泰山赤灵芝菌种在不同碳源、氮源及不同配方的母种培养基上的生长试验,筛选出适合其生长的最适碳源、氮源和最适母种培养基配方.结果表明:泰山赤灵芝菌株菌丝体在玉米粉