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目的
探讨H7N9流感病毒神经氨酸酶（neuraminidase, NA）基因非翻译区（untranslated region, UTR）可变区碱基多态性对NA基因转录与翻译的影响。
方法通过生物信息学方法分析H7N9流感病毒NA基因UTR的可变区碱基多态性位点，人工合成N9-UTR可变区随机突变文库。利用自主构建的RNA聚合酶I eGFP报告系统，构建N9-3’UTR-eGFP-5’UTR RNA聚合酶I随机突变荧光报告文库。从N9-UTR突变荧光报告文库中随机挑选克隆转染H1N1流感病毒辅助感染的MDCK细胞，荧光显微镜观察eGFP的荧光表达，同时用多功能酶标仪定量检测eGFP的相对荧光强度；利用β-actin作为内参，采用实时荧光RT-PCR定量检测eGFP基因的转录变化。测序鉴定eGFP上调或下调的N9-UTR克隆并分析导致eGFP表达变化的UTR可变区SNP特征。
结果随机筛选了6个N9-UTR可变区随机突变荧光报告克隆，发现N9-2克隆的eGFP下调，而N9-7克隆eGFP上调。测序分析发现突变核苷酸位点位于5’UTR的27位，eGFP上调表现为A27G。
结论H7N9流感病毒NA基因的5’UTR可变区A27G突变可增强NA基因转录与翻译。