【摘 要】
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目的探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白(SVLBP)的抗原性及其诊断价值.方法SVLBP基因亚克隆入pQE-30表达载体,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白;非变性条件下制备克
【机 构】
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浙江省医学科学院寄生虫病研究所,杭州,310013;Molecular Parasitology Unit,Queensland Institute of Medical Research,Brisb
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目的探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白(SVLBP)的抗原性及其诊断价值.方法SVLBP基因亚克隆入pQE-30表达载体,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白;非变性条件下制备克隆菌裂解液,用亲和层析法纯化重组蛋白;用Western blot鉴定其抗原性;纯化SVLBP重组蛋白免疫家兔获得抗血清;以SVLBP重组蛋白为抗原,ELISA法检测血吸虫感染者血清及健康人血清.结果克隆菌在IPTG诱导下高表达SVLBP重组蛋白;该重组蛋白诱导家兔产生单特异抗体,抗体滴度为1∶6400;SVLBP重组蛋白与血吸虫病人血清有较强的反应;以该蛋白为抗原检测36人份血吸虫感染者血清,阳性率为83.3%,50人份健康人血清,假阳性率为2%(1/50),10人份肺吸虫病人血清,1例阳性,交叉反应率为10%(1/10).结论SVLBP重组蛋白有较好的抗原性,以该重组蛋白为抗原检测日本血吸虫病患者血清中特异性抗体,敏感性和特异性均较高,具有一定的诊断价值.
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