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目的建立一种以TaqMan为探针检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)的实时定量PCR检测方法。方法根据rcDNA与cccDNA结构差异,在缺口两侧设计引物,应用TaqMan探针分析,对实时PCR产物进行克隆、测序以证实产物为目的片段;同时对89例符合病毒性乙型肝炎诊断标准的血清样本进行HBVcccDNA和HBV DNA含量检测,3例未感染乙肝病毒的血清作为阴性对照。结果测序结果显示扩增产物为目的片段,检出下限为500 copies/mL;89例样本检测HBV cccDNA的阳性率为55.0%