黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1/NO的影响

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目的 探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的影响.方法 用DMEM培养液在37℃、5% CO2条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后,调细胞密度为1×105,并分为7组:A组:空白组,不加任何诱导剂;B组:TNF-α(40ng/ml)诱导组;C组:TNF-α(40ng/ml)+氯沙坦钾(105 mol/l);D组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml);E组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(1mg/ml);F组:TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(10mg/ml);G组:TNF-α (40ng/ml)+毛蕊异黄酮(20mg/ml).分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液,用ELISA检测上清液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的含量.结果 ①与空白组比较,TNF-α降低了ECV-304NO水平(P<0.001)、提高了ET-1水平(P<0.001);②氯沙坦钾提高了ECV-304NO水平(P <0.001)、降低了ET-1水平(P<0.001);③毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml~10mg/ml)能够促进ECV-304细胞NO的产生(P<0.001)、降低ET -1的产生(P<0.001);④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮(20mg/ml)对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异((P>0.05);⑤毛蕊异黄酮浓度(在0.1 mg/ml ~20mg/ml内)与ECV-304 ET-1的分泌呈负相关性(r=-0.02、P<0.001);与ECV-304NO的分泌呈正相关性(r=0.0075、P <0.001).结论 黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF-α诱导的内皮细胞NO分泌,抑制ET-1分泌,并在一定浓度内(0.1 mg/ml~20mg/ml)呈浓度依赖性.
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