通络益肾方对高糖诱导肾小球系膜细胞GRP78、Caspase-12表达的影响

来源 :中国中西医结合肾病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuxinghuajia
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目的:观察通络益肾方含药血清对高糖培养下大鼠系膜细胞(MC)增殖及GRP78、Caspase-12 mRNA表达的影响,从内质网应激角度探讨该方的肾保护机制。方法:肾小球MC随机分为6组:正常组、模型组、通络益肾方大、中、小剂量组及西药组,分别培养12 h、24 h、48 h和72 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MC增殖情况,RT-PCR检测各组MC、GRP78、Caspase-12 mRNA的表达水平。结果:(1)模型组MC在各时间点均明显增殖(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,中药大、中、小剂量组在24 h、48 h、72 h均能抑制MC增殖(均P<0.01),其中以大剂量组效果最佳(P<0.01);西药组MC增殖在12 h、24 h低于中药大剂量组(均P<0.05),而在48 h、72 h两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与正常组比较,模型组GRP78 mRNA在24 h、48 h持续升高,而72 h明显下降(P<0.05,P<0.01)。四个给药组之间GRP78 mRNA比较,48 h时呈西药组>中药小剂量组>中剂量组>大剂量组,72 h时呈西药组>中药小剂量组>大剂量组(均P<0.05,P<0.01)。同时各给药组GRP78 mRNA表达呈现出从24 h、48 h到72 h持续缓慢增加的趋势,表明药物可延缓GRP78增幅、延缓ERS而持续发挥其保护细胞的作用。(3)Caspase-12 mRNA结果显示:与正常组比较,模型组48 h、72 h时Caspase-12mRNA明显增加(P<0.01),而各给药组Caspase-12 mRNA均较模型组明显下降(P<0.05或P<0.01),48 h时三个中药组Caspase-12 mRNA表达明显低于西药组(P<0.05);72 h时三个中药组呈小剂量组>中剂量组>大剂量组(P<0.01或P<0.05),提示casspase-12 mRNA表达与给药剂量呈负相关。结论:高糖条件下大鼠肾小球MC内质网应激明显,通络益肾方可明显抑制MC的增殖,推测其作用机制与延缓GRP78增幅、下调Caspase-12 mRNA的表达有关。
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