【摘 要】
：
本研究以小麦淀粉分支酶(starch branching enzyme, SBEIIa)为研究对象,选取SBEIIa基因外显子5’端的第一及第二个外显子区域的4个SBEIIa-gRNA参试靶点进行靶位点活性检测,确
【机 构】
：
宁夏农林科学院农业生物技术研究中心;
【基金项目】
：
宁夏回族自治区农业育种专项(2013NYYZ02);宁夏回族自治区重点研发计划项目(对外科技合作)共同资助
论文部分内容阅读
本研究以小麦淀粉分支酶(starch branching enzyme, SBEIIa)为研究对象,选取SBEIIa基因外显子5’端的第一及第二个外显子区域的4个SBEIIa-gRNA参试靶点进行靶位点活性检测,确定最佳基因敲除靶点。采用试剂盒法,以选定基因敲除靶点序列设计gRNA引物,通过oligo二聚体(Oligoduplex)合成、oligo二聚体插入载体、转化及鉴定等步骤,构建具有表达小麦淀粉分支酶gRNA (guide RNA)的CRISPR/Cas9基因敲除系统,获得小麦淀粉分支酶基因敲除载体。根据载体中插入序列,进行测序分析;测序结果能够确认gRNA已经完整准确地连入载体。研究构建的小麦淀粉分支酶基因敲除载体能对小麦SBEIIa基因表达量进行负向调控,对后续小麦淀粉分支酶基因及向其它相关基因编辑调控研究提供科学依据。
其他文献
分别按国家标准和企业标准中紫外分光光度法测定了两个酶制剂企业生产的木瓜蛋白酶酶活力,结果表明,企业标准与国家标准测定的酶活力两种方法测定的结果差别高达几十倍,原因
通过员工违章违制积分管理,对减少和控制员工违章作业行为收效良好,进一步强化企业安全生产管理和提高员工安全意识、安全意愿,落实全员安全责任,有效预防安全事故,促进企业
随着全球经济的快速发展和我国改革开放的进一步深化,区域内部产业结构不断优化升级,城市逐渐由生产型向消费型转变,商业服务业逐渐成为城市经济增长的主要动力。而商业空间
汽车起重机液压油箱应有足够的容积，以保证液压系统用油和足够的散热面积以提高系统的效率。为保持液压油的清洁，还要求有分离液压油中的泡沫、杂质等功能。近年来，我们在开发液
<正>30年来,我逐渐感受到从事生理学的教学和科研是一项多么美好的事业! 在人类进化和发展的历程中,生理学仅有 300多年的历史。她好象是刚出生的和初升的太阳。这是一种充满
内容依托教学模式用于英语口语课堂,以小组合作汇报作为主要的活动形式,督促和引导学生以与专业相关的话题为载体来学习和提高英语口语教学。结果证明,这种方式对于大部分同
近些年,我国地铁建设日新月异,地铁附属开发逐渐成为一种新的开发模式。由于地铁的制约,其附属商业开发出现很多大跨度建筑。在使用中,人的活动引起楼板竖向振动的控制对于建
马铃薯微型薯生产技术的应用和推广是马铃薯良种繁育的一项重大改革。根据多年的实践经验阐述了马铃薯微型薯生产栽培的两种方法,意欲和同仁们商榷讨论。
目的探讨研究院前急救对中重度急性有机磷农药中毒患者预后的影响。方法收集2009年6月～2011年6月于本院接受诊断和治疗的120例中重度急性有机磷农药中毒患者,随机分为对照组和
变形监测正向高精度和自动化方向发展,对变形监测手段和变形数据处理与分析提出了更高的要求。为了获得高精度的形变量,除了要提高监测仪器本身的精度之外,有必要寻求更适合