探讨磷脂酰肌醇3-激酶δ(PI3Kδ)-Ras同源基因家族成员A (RhoA)通路在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能低下中的作用。

40只SPF级8周龄雄性BALA/c小鼠，20只使用烟草烟雾暴露法建立慢阻肺模型，20只常规饲养。根据随机数字表分为健康对照组、慢阻肺组、健康IC87114(PI3Kδ抑制剂)组及慢阻肺IC87114组。其中IC87114组AM培养基中加入终浓度1 nmol/L IC87114培养24 h。不连续密度梯度离心法分离AM，流式细胞术测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-E.coli)的能力，以平均荧光强度(MFI)和吞噬FITC-E.coli阳性细胞百分比(吞噬%)表示；实时荧光定量PCR及蛋白印迹法(Western blot)测AM PI3Kδ、RhoA mRNA和蛋白表达；小G蛋白活性试剂测量AM RhoA活性；激光共聚焦显微镜观察细胞骨架。

AM吞噬能力：慢阻肺组MFI和吞噬% [(4 512±517)、(32.2±4.6)%]均低于健康对照组[(9 857±1 042)、(68.0±4.0)%，均P<0.01]；慢阻肺IC87114组[(6 894±472)、(50.6±2.1)%]均高于慢阻肺组(均P<0.01)。AM PI3Kδ mRNA和蛋白表达：慢阻肺组(3.14±0.54、0.84±0.08)均高于健康对照组(1.00±0.00、0.57±0.07，均P<0.01)；慢阻肺IC87114组(1.52±0.28、0.66±0.13)均低于慢阻肺组(均P<0.01)。AM RhoA mRNA、蛋白表达及活性：慢阻肺组(0.70±0.07、0.41±0.10、0.70±0.06)均低于健康对照组(1.00±0.00、0.56±0.09、1.19±0.09，均P<0.01)；慢阻肺IC87114组(0.91±0.08、0.48±0.06、0.86±0.06)均高于慢阻肺组(均P<0.05)。AM细胞骨架变化：健康对照组和健康IC87114组伪足伸出良好，吞噬FITC-E.coli能力较强；慢阻肺组伪足伸出不良甚至缺失，吞噬FITC-E.coli能力受损；慢阻肺IC87114组伪足伸出情况及吞噬能力较慢阻肺组改善。相关性分析：基础状态和IC87114干预后，AM的PI3Kδ mRNA、蛋白表达与RhoA mRNA、蛋白表达及活性均呈负相关，PI3Kδ mRNA、蛋白表达与MFI均呈负相关，RhoA mRNA、蛋白表达及活性与MFI均呈正相关。

慢阻肺小鼠AM吞噬功能低下，细胞骨架异常重排；PI3Kδ特异性调控RhoA，且两者呈负相关；慢阻肺小鼠AM PI3Kδ过度活化致RhoA活性降低从而使AM细胞骨架异常重排与其吞噬功能低下有关；PI3Kδ抑制剂IC87114抑制慢阻肺小鼠AM PI3Kδ活化，使RhoA活性改善，部分恢复慢阻肺AM吞噬功能。