腺病毒六邻体蛋白的基因测序在流行性角膜结膜炎病原检测中的应用

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背景

流行性角膜结膜炎是常见的眼部传染性疾病,腺病毒为常见病原体之一。六邻体蛋白是构建病毒衣壳的重要蛋白,也是病毒与抗体结合的主要靶点。应用针对六邻体蛋白编码区的测序方法可对腺病毒进行快速分型,对于流行性角膜结膜炎的早期诊断、病情监测和预后判断具有重要意义。

目的

通过针对腺病毒六邻体蛋白编码区的测序,完成上海地区腺病毒与流行性角膜结膜炎相关的分子流行病学调查。

方法

在受检者知情同意的情况下,收集2010年1月至2012年12月在上海市眼病防治中心和上海市急性出血性结膜炎防控办公室下属红眼病监测站点就诊的214例可疑流行性角膜结膜炎患者结膜囊的结膜拭子样本214份。对结膜囊标本提取DNA后,通过PCR法扩增病原体六邻体蛋白编码区内140 bp的保守序列,对于腺病毒阳性的标本,通过对六邻体蛋白保守区域内956 bp的序列进一步测序以确定其病毒分型。

结果

在214例患者中,109例在通用PCR中显示腺病毒阳性,占50.93%。其中通过基因测序确定AdV1者4例,AdV2者33例,AdV3者15例,AdV4者12例,AdV8者19例,AdV19者15例,AdV37者8例。属于D组腺病毒的AdV8、AdV19和AdV37检出阳性患者更容易出现角膜炎症反应、伪膜性结膜炎和耳前淋巴结肿大等,而B组腺病毒检出阳性者易伴发上呼吸道感染,但角膜受累者较少。

结论

针对六邻体蛋白编码区内保守区域的测序是腺病毒分型的重要方法之一,可快速确定流行性角膜结膜炎是否系腺病毒感染引起,并确定腺病毒分型。

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