【摘 要】
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本试验成功构建了表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区3个中和线性表位的重组犬腺病毒2型两个重组质粒.引用相关文献已报道的狂犬病病毒糖蛋白膜外区的3个中和线性表位基因,通过有柔
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,军事医学科学院十一所流行病学研究室
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本试验成功构建了表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区3个中和线性表位的重组犬腺病毒2型两个重组质粒.引用相关文献已报道的狂犬病病毒糖蛋白膜外区的3个中和线性表位基因,通过有柔性氨基酸将其3个表位基因相连.将重叠延伸PCR获得3个串联表位基因片段克隆人含犬腺病毒2型YCA18株纤突头部HI环的中间载体pBluescriptⅡKS(+)中,然后用Sal Ⅰ和PacⅠ将中间载体中含3个串联表位的纤突部分回收,克隆至缺失纤突部分的犬腺病毒2型全基因组重组质粒pPloyⅡ-CAV-2及pPloyⅡ-CAV-2-CGS中.经鉴定成功获得在犬腺病毒2型纤突头部HI环处插有狂犬病毒3个串联表位的两个重组质粒,分别命名为pPoly Ⅱ-CAV-2-RG和pPoly Ⅱ-CAV-2-CGS-RG.经软件对犬腺病毒2型纤突蛋白的构象分析表明,在其HI环插入外源抗原表位基因不影响其免疫原性.本试验为进一步研制多抗原表位展示性重组疫苗、新型狂犬病疫苗奠定基础.
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