核因子κBp65在石墨烯诱导人肾小球足细胞上皮间质转分化中的作用

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongtu200909
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本研究旨在探讨石墨烯通过核因子κBp65(NF-κBp65)信号通路促进肾小球足细胞上皮间质转分化(EMT)的机制。方法如下:(1)体外培养足细胞经0、10、20、40 mg/L石墨烯刺激24 h,实时定量PCR及Western印迹法检测EMT相关上皮表型蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin及间质表型蛋白α-SMA、Desmin的mRNA及蛋白表达,Western印迹法检测信号通路蛋白NF-κBp65表达;(2)在20 mg/L石墨烯中加入NF-κB特异性抑制剂BAY11-7082后,实时定量PCR及Western印迹检测EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin及α-SMA、Desmin mRNA及蛋白表达,免疫荧光染色法观察各浓度石墨烯刺激下Nephrin和α-SMA等足细胞EMT相关表型蛋白的变化。结果发现,与对照组相比,不同石墨烯浓度刺激下NF-κBp65蛋白表达升高,EMT相关蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin表达量下降,α-SMA、Desmin蛋白表达量升高,上述蛋白的mRNA表达变化与其蛋白表达一致;与20 mg/L石墨烯组相比,使用NF-κBp65信号通路特异性抑制剂BAY11-7082后EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA、Desmin蛋白表达下降,上述蛋白的mRNA表达变化与其蛋白表达一致。作者认为,石墨烯经NF-κBp65信号通路促进肾小球足细胞EMT,抑制NF-κB信号通路能够抑制足细胞EMT。

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