【摘 要】
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目的 为进一步研究脂联素（ADPN）的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素（hADPN）真核表达载体的3T3-L1细胞株。方法 酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcD
【机 构】
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北京市石景山医院内分泌科,北京大学医学部人体解剖学教研室,安徽医科大学第一附属医院内分泌科
【基金项目】
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安徽省自然科学基金资助（03043719）
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目的 为进一步研究脂联素（ADPN）的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素（hADPN）真核表达载体的3T3-L1细胞株。方法 酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcDNA3.1＋,回收目的基因片段与线性化的真核表达质粒,经连接、转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,经酶切和核苷酸序列测定鉴定。脂质体法转染3T3-L1细胞,G418筛选阳性细胞克隆扩增,通过RT-PCR的方法逆转录合成脂联素基因片段。结果 重组真核表达质粒酶切后获得5.4kb和800bp两个片段,大小与理论
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