侧脑室注射miR-219激动剂对脂多糖所致新生大鼠少突胶质细胞成熟障碍的影响

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:deiaw
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目的 探讨侧脑室注射miR-219激动剂对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致新生大鼠少突胶质细胞成熟障碍的影响。方法 将出生2 d的Sprague-Dawley(SD)大鼠60只随机分为4组,每组15只。对照组:腹腔注射等体积生理盐水,24h后侧脑室注射2μL miRNA阴性对照。脂多糖组(LPS组):腹腔注射0.25mg/kg LPS,24h后侧脑室注射2μLmiRNA阴性对照;miR-219激动剂组(miR-219组):腹腔注射等体积的生理盐水,24h后侧脑室注射2μL miR-219激动剂;LPS加miR-219激动剂组(LPS+miR-219组):腹腔注射0.25mg/kg LPS,24h后侧脑室注射2μL miR-219激动剂。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测脑组织中miR-219和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)mRNA的表达,苏木素伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑白质形态学改变,免疫组化观察成熟少突胶质细胞(Oligodendrocyte,OL)的表达,免疫印迹法(western blotting)检测脑组织内MBP和Sox6蛋白的表达。结果 侧脑室注射miR-219激动剂后,miR-219组miR-219的表达增高(P<0.05);腹腔注射LPS后,LPS组脑白质区组织结构疏松,细胞核固缩,与对照组比较,成熟少突胶质细胞标志物MBP的表达显著下降,少突胶质细胞分化抑制因子Sox6表达明显增多(P<0.05);相较于LPS组,LPS+miR-219组MBP表达增多,Sox6表达显著降低(P<0.05),且与对照组无明显差异(P>0.05)。结论 侧脑室注射miR-219激动剂可以改善LPS致新生鼠少突胶质细胞成熟障碍。
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