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目的制备针对牛分枝杆菌热休克蛋白65（HSP65）的单克隆抗体（mAb）并进行鉴定。方法以CpG ODN1826／Alum为佐剂，不同的HSP65融合蛋白为免疫抗原和检测抗窄，用聚乙二醇（PEG）法制备杂交瘤细胞，ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型，Western blot分析抗体的特异性。结果获得5株稳定分泌抗HSP65蛋白的MeAb，3株细胞分泌的mAb为IgG1亚类，2株为IgG2a。ELISA和Western blot结果显示，mAb能特异性结合HSP65-PSA-tag、HSP65-M