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目的：构建Flag-RNF8真核表达质粒，证实融合蛋白在前列腺癌细胞内的表达与定位。方法：提取人前列腺癌细胞CWR22RV1总RNA，反转录为cDNA。PCR扩增RNF8全长编码区cDNA序列，亚克隆至含有Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到前列腺癌细胞CWR22RV1中，提取细胞蛋白进行Western blot检测，同时利用共聚焦激光扫描显微镜观察Flag-RNF8在CWR22RV1细胞内定位。使用免疫沉淀的方法纯化RNF8蛋白。结果：RNF8蛋白全长编码区cDNA克隆到了真核表达